2026年6月22日，科济药业开发的靶向CLDN18.2的自体CAR-T细胞治疗产品舒瑞基奥仑赛注射液（satri-cel，研发代号CT041）获批上市，成为全球首款获批用于实体瘤的CAR-T产品。这一里程碑意味着，CAR-T正在从血液瘤进一步迈向实体瘤，也让CLDN18.2这一靶点再次受到关注。
在CLDN18.2 CAR-T研发过程中，一个基础且关键的问题是：
“ 经过转导或编辑后，有多少细胞成功表达CAR？这些CAR又能否正确识别CLDN18.2抗原？”
这正是CAR阳性率检测需要回答的问题。
1、检测到CAR表达，不等于证明CAR能够识别靶点
Protein L、Anti-Fab或Anti-linker抗体常用于CAR阳性率检测，可以判断CAR相关结构是否表达在细胞表面。但这些方法检测的是CAR中的轻链、Fab或linker结构，并不能直接证明CAR仍具有识别目标抗原的能力。
对于CLDN18.2等复杂膜蛋白靶点，这一点尤其重要。CLDN18.2是典型的四次跨膜蛋白，其胞外区域较短，部分CAR可能识别由胞外环及其空间构象共同形成的表位。单独使用截短胞外片段，可能难以完整呈现天然抗原结构，从而导致结合信号减弱，甚至出现假阴性。
因此，使用结构更接近天然状态的全长CLDN18.2作为检测抗原，可以为CAR阳性率分析提供更具生物学意义的结果。
2、PeptiNanodisc：用全长CLDN18.2蛋白直接检测CAR阳性细胞
缔码生物PeptiNanodisc采用特定设计的两亲性多肽包裹膜蛋白疏水区域，使全长膜蛋白能够稳定存在于水溶液中。
该体系无需脂质双层和膜支架蛋白，可保留CLDN18.2的跨膜区、胞外区及其相对空间关系，呈现更接近天然状态的抗原构象。
在CAR阳性率检测中，PeptiNanodisc通过全长CLDN18.2与CAR之间的特异性结合识别CAR阳性细胞。
因此，它不仅能够回答：
“ 有多少细胞表达CAR？”
还能够进一步验证：
“ 这些CAR是否仍然具备识别CLDN18.2的能力？”
关于PeptiNanodisc的技术原理、CAR阳性率检测方法比较及完整实验数据，可阅读往期专题文章：膜蛋白CAR阳性率检测难题，用PeptiNanodisc一招破解！
2.1 实测验证：CLDN18.2 PeptiNanodisc可用于CAR阳性率检测
缔码生物使用Human CLDN18.2 Full Length Protein-PeptiNanodisc（货号：FLP420014）对CLDN18.2 CAR转导细胞进行流式检测。结果显示，该产品能够特异性识别CAR表达细胞，并用于CAR阳性率分析。
实验结果显示，无论是未标记版本还是FITC标记版本的CLDN18.2 PeptiNanodisc，均能够有效识别CAR阳性细胞，其检测结果与G4S-PE等常用CAR检测方法具有良好一致性。
未标记CLDN18.2 PeptiNanodisc
FITC标记CLDN18.2 PeptiNanodisc
与需要加入荧光二抗的间接检测方法相比，FITC标记PeptiNanodisc可直接与CAR细胞孵育并进行流式分析，无需额外添加荧光二抗，有助于：
- 简化实验步骤
- 缩短检测时间
- 减少二抗引入的非特异性背景
- 降低不同批次二抗造成的实验差异
更重要的是，该方法基于“全长靶抗原—CAR”的特异性结合，能够将CAR表达检测与抗原结合验证结合在同一次实验中。
2.2 为CLDN18.2 CAR研发提供更具功能意义的检测工具
全长CLDN18.2 PeptiNanodisc可用于：
- CLDN18.2 CAR阳性率检测
- 不同scFv或CAR结构候选物比较
- CAR表面表达与靶抗原结合的正交验证
- CAR-T、CAR-NK等工程化细胞的研究与方法开发
在实际研究中，还可以将PeptiNanodisc与Protein L、Anti-Fab或Anti-linker抗体配合使用：
|
检测方法 |
主要检测维度 |
|
Protein L、Anti-Fab、Anti-linker |
CAR相关结构是否表达 |
|
CLDN18.2 PeptiNanodisc |
CAR是否能够识别全长CLDN18.2 |
|
FITC标记PeptiNanodisc |
直接检测CAR阳性率及靶点结合细胞比例 |
通过不同原理的检测方法相互验证，可以更全面地评价CAR构建体的表达状态与抗原结合能力。
不只检测CAR是否表达，更要验证CAR能否识别真实靶点
随着CLDN18.2 CAR-T正式进入商业化阶段，实体瘤细胞治疗将进一步向更多复杂膜蛋白靶点拓展。对于依赖天然构象和空间表位的膜蛋白靶点，PeptiNanodisc以可溶、稳定的全长膜蛋白作为检测抗原，为CAR阳性率及靶点结合验证提供了更直接的解决方案。
用全长靶抗原检测CAR阳性率，让每一个阳性信号都更接近真实的靶点识别。
立即联系缔码生物，获取CLDN18.2 PeptiNanodisc样品信息、完整检测数据或定制方案。(400-006-0995/18062749453)
